期刊简介
本刊的办刊宗旨是：提高临床内科医师的理论水平和诊治技能，拓宽其临床诊断思维，丰富诊治经验，以综合提高其对内科疾病分析、诊断、鉴别诊断、治疗、病情观察和预后判断的能力。
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- 杂志名称：内科理论与实践杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：上海交通大学医学院附属瑞金医院
- 国际刊号：1673-6087
- 国内刊号：31-1978/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
小鼠谷胱甘肽S转移酶K1启动子荧光素酶报告基因的构建及功能鉴定
胡文秀；方启晨；董坤；宋倩倩；姜杉；杨文静；贾伟平
关键词：小鼠谷胱甘肽S转移酶K1, 启动子, 荧光素酶, 报告基因
摘要：目的:构建小鼠谷胱甘肽S转移酶K1 (mGSTK1)启动子荧光素酶报告基因质粒,并分析其活性.方法:根据GeneBank中mGSTK1基因序列设计引物,应用PCR技术扩增mGSTK1启动子片段,插入pGL3-basic载体,获得mGSTK1启动子报告基因质粒pGL3-mGSTKl-2046.再以pGL3-mGSTK l-2046为模板,进一步构建了2个5’端部分缺失的报告基因质粒:pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK l-76.将构建的报告基因质粒瞬时转染不同的细胞株3T3-L1和人胚肾(HEK)293,48 h后检测荧光素酶的活性.结果:所构建的质粒经酶切、测序鉴定正确.pGL3-mGSTK1-2046在3T3-L1和HEK293中均有不同程度的转录活性.将pGL3-mGSTK1 -2046、pGL3-mGSTK1 -936和pGL3-mGSTK1 -76转染HEK293细胞.结果显示pGL3-mGSTK1 -936转录活性高,而pGL3-mGSTK1 -76转录活性显著降低.结论:成功构建mGSTK1启动子荧光素酶报告基因质粒；翻译起始点上游的-971～-111 bp片段是mGSTK1启动子的重要区域.为深入了解mGSTK1启动子的调控机制以及今后对代谢性疾病的治疗提供一定的实验基础.
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